开云体育官网-包含V5血洗NS，Crisp送出助攻的词条

　　那啥，鹿晗的事情已经过去了吧？

(图片来源于：blog.163.com)

　　咱们来说说科学明星——Jennifer Doudna。

　　每一次，当Jennifer和CRISPR同时出现的时候，都能引得生物界的一阵骚动。Jennifer的科研动向也总是能轻松占据各生物专业媒体的头条。

　　很多媒体称她为CRISPR女神。而CRISPR女神的背后，站着一位更为真实的结构生物学家——Jennifer Doudna。

　　从今年开年到现在，仅就大家普遍最关心的CRISPR-Cas9，Jennifer Doudna就在行业顶级期刊CNS上发表了4篇文章。

　　很多很多生物专业的媒体对这些文章做了报道。很多很多人对Jennifer表示出崇拜之情。可是，Jennifer的成功可能还因为她看世界的眼睛与你不同。

　　仅需3分半钟时间，让我们从Jennifer看世界的结构生物学角度，瞅一瞅Jennifer今年又对CRISPR-Cas9做了哪些改进和揭秘~

（视频来自“博雅辑因科技”公众号）

　　不想看视频的同志们，以下是文字版~但是还是建议看视频啦，毕竟CRISPR-Cas9构象的改变还是看动画来得更清楚。

　　--------分割线--------

　　总的来说，今年，Jennifer以一篇Science，一篇Nature，从分子结构的角度部分阐释了Cas9的精确调控机制，并以1篇Cell，一篇Scinece解释了3个抗CRISPR蛋白ACRIIC1,ACRIIC3以及ACRIIA4的作用原理。

　　前面这篇Science给我们展示了Cas9在结合DNA后，切割DNA前的一个中间态构象。Cas9结合DNA后，其HNH结构域会发生数个构象改变，直到其确定这段DNA与sgRNA序列足够匹配，HNH就会从这个中间构象的位置，移至其工作位点，激活并切割DNA。否则则不会。当DNA切割完成后，HNH会保持激活态一段时间，直到Cas9释放掉结合的这段DNA的非目标序列。另外，HNH从中间态转变为激活态需要二价阳离子的参与。并且，随着二价阳离子浓度的升高，Cas9可以有更高的容错性，使得HNH在DNA与sgRNA匹配度较低的情况下被激活。

　　那么，HNH是如何感知DNA与sgRNA匹配度的呢？

　　Jennifer紧接着的一篇Nature给出了解释。

　　感知DNA与sgRNA匹配度的是REC3结构域，当其觉得该匹配度足够时，就会向REC2结构域发出信号，使其为HNH打开一条通路，使HNH移至其激活位，并最终完成对DNA的切割。当然了，如果通过一些突变，改变REC3的容错性，就能够调整整个Cas9的精确度。然而，切割足够多的靶序列，与避免脱靶效应之间永远都存在矛盾。往往避免脱靶效应，就会减少一些靶序列的切割，降低效率。但是，Jennifer的这篇Nature证明了，至少在某些情况下，通过突变REC3的几个氨基酸残基，可以在基本保持Cas9效率的情况下，明显降低脱靶率。

　　随着Cas9工作时间的延长，完全匹配的DNA被切割和编辑，非完全匹配的DNA占比会越来越高，于是发生错配脱靶的概率也越高。因此，及时终止Cas9工作，或者说给Cas9安刹车，可以降低脱靶率，提高Cas9编辑的精确性。

　　而Jennifer这篇Cell

　　和Science

　　便是从结构生物学的角度解答了3个抗CRISPR蛋白如何给Cas9刹车的问题。Jennifer找出了ACRIIC1与HNH结合在一起的晶体结构，证明ACRIIC1是通过与HNH结合，阻止其作为DNA酶切割DNA的。因为HNH在Cas9同源蛋白中相对保守，因此 ACRIIC1可用于多种Cas9同源蛋白。而ACRIIC3则只针对一种Cas9同源蛋白，使两个这样的Cas9形成二聚体，从而阻挠Cas9与DNA结合。为证实这一点，Jennifer同样获得了该二聚体的晶体结构。

　　ACRIIA4则采用的另外一种方式，通过模拟DNA，与Cas9的PAM识别区结合，阻止Cas9识别靶序列，从而制止了Cas9进一步工作。而之所以有这篇文章的诞生，是因为Jennifer又解出了一个新的结构，就是CAS9-sgRNA-ACRIIA4聚合体。

　　--------分割线--------

　　是的，每一次让人欢呼的结果背后都是不变的结构解析。Jennifer之所以能成为女神，结构解得好自然是必须的。但与CRISPR的偶然相遇，才使她最终走上了事业的巅峰。从此，无论是名气还是发文章的速度都一路开了挂~

　　所以，我们在崇拜羡慕的同时，是不是也应该更加专注于自己的领域，努力提升自己的能力，在机遇来临的时候，更好地把握呢？

　　那么，就从认真看我们每一次的小视频开始吧。。。。

　　哈哈哈。。。。

　　如果我们的视频对您有帮助

　　不要吝惜分享给其他需要的人哦